研究进展：狂犬病是一种由狂犬病病毒（RABV）引起的致命性人畜共患病，死亡率接近100%。全球每年在低收入和中等收入国家有超过59000人死于狂犬病，主要影响儿童。病毒通过被感染动物的咬伤传播，目前尚无有效的临床治疗方法，尤其在病毒侵入中枢神经系统（CNS）后，治疗更加困难。血脑屏障（BBB）的存在限制了药物进入大脑，阻碍了治疗剂向狂犬病感染区域的递送，增加了治疗的难度。光动力疗法（PDT）是一种非侵入性治疗方法，通过光敏剂在光照下产生活性氧（ROS）来破坏靶细胞，但传统PDT存在光热效应可能损伤周围健康组织的问题。此外，近红外二区（NIR-II）成像技术因组织穿透深、信噪比高，为深层组织诊疗提供了新方向。

解决方案：在此，作者开发了一种靶向狂犬病病毒（RABV）的NIR-II荧光纳米诊疗探针DK@RA-PEG，该探针由有机聚乙炔荧光团（DK）、RVG肽修饰的纳米载体及RABV特异性适配体组成（见图1）。如图2所示，DK发射波长延伸至NIR-IIa区（990–1300 nm），具备深层组织穿透能力（8 mm）和高光稳定性（50分钟照射下强度无衰减），并通过点击化学自组装形成均匀纳米颗粒（平均尺寸174 nm）。探针表面修饰的RVG肽和适配体协同增强血脑屏障穿透能力及病毒靶向性，如图3所示，体外免疫荧光显示其与RABV糖蛋白（RVG）高度共定位。在808 nm激光激发下，探针选择性产生活性氧（ROS，包括¹O₂和O₂⁻），无显著光热效应（温度仅升高至31.9 ℃），避免神经损伤（见图4）。在RABV感染小鼠模型中（图5），探针经静脉注射后24小时脑部富集达峰，联合光动力治疗使生存率提升至40%，且治疗后小鼠神经功能正常（Morris水迷宫测试无异常）。此外，探针在正常组织中无显著毒性（溶血率<1%），展现出临床转化潜力。体外实验显示（图6），光动力治疗后病毒滴度降低12倍（EC₅₀ = 6.23 nM），RT-qPCR和Western blot证实病毒RNA及蛋白表达显著抑制。

图1：设计策略。

图2：纳米平台的构建和表征。

图3：DK@RA-PEG对RABV的体外抗病毒活性。

图4：经RABV处理和DK@RA-PEG + NIR激光处理的BSR细胞的转录组分析。

图5：DK@RA-PEG在体内的靶向能力和药物光照间隔。

图6：DK@RA-PEG的体内抗病毒活性。

结论：本研究开发了一种新型NIR-II荧光纳米诊疗探针DK@RA-PEG，它能有效穿越血脑屏障，精准靶向狂犬病病毒，用于NIR-II成像引导的光动力治疗。体内外实验表明，该探针对狂犬病病毒具有显著的光动力抑制效果，能有效清除感染细胞中的病毒，降低病毒载量。在狂犬病病毒感染的小鼠模型中，经其介导的光动力治疗使小鼠生存率提高约40%，治疗后小鼠行为未受影响，且未见明显组织炎症。这为狂犬病的临床治疗提供了新策略。

参考文献：Qihang Ding. et al. Rabies Virus Targeting NIR-II Phototheranostics. DOI: 10.1021/jacs.5c04975.