细胞培养是从事科研工作最基本的技能。我们将从常用细胞目录展开,并分享细胞实验相关技能。以下是来自中山大学细胞库目录,供果友们参考,并不全面,但是足够果友们参考。一株细胞的价格在1000~3000,稀有细胞可能更贵。对于从事肿瘤相关研究,常用的肿瘤细胞株需要熟悉。
培养过细胞的小伙伴们,肯定听过293细胞 (全名HEK293),但至于293细胞家族的其他衍生细胞却未必熟悉。293细胞的衍生细胞可分为数种,比如293T细胞,293A细胞,293E细胞,293FT细胞等等。有网友总结说,293A是用来包腺病毒的,293T是用来包慢病毒的。总体而言,293细胞容易转染,是实验室最常用的表达兴趣基因的细胞株。

最原始的HEK293细胞来源于一个夭折的人类胚胎肾细胞(1973年)。HEK293细胞是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒DNA(Ad5 DNA)而得到的永生化细胞,表达稳转的Ad5 DNA的基因,不易贴壁,表达E1A蛋白。293T细胞由HEK293细胞衍生而来,是SV40 large T抗原稳转得到的细胞株,贴壁不牢。293T细胞还表达E1A蛋白,SV40 large T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。293T细胞容易转染,用磷酸钙、PEI或脂质体转染,效率均可达90%以上。除用于基因表达及蛋白生产外,还用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。

293T/17细胞是293T细胞中共转染pBND和pZAP质粒而获得的具有G418耐受的细胞系。该细胞系仍保留高转染效率的特点。293T/17SF细胞是在293T细胞中转入EBV基因形成的转化细胞系,该细胞系主要用于瞬时转染及蛋白表达,类似于293E细胞的作用。
293H细胞是293细胞驯化后得到的、能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。该细胞系贴附牢固,主要用于噬菌斑检测等。293A (adherent)细胞是293细胞的衍生株,倾向于形成单层细胞(monolayer)。在进行病毒滴度测定的空斑试验(plaque assay)时,293A细胞是均匀的单层,没有细胞重叠和间隙。
293E细胞是293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系,该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白,含有EBV复制起点(oriP)的重组表达质粒。293-6E细胞是在293-H细胞中插入截短过后的EBNA-1基因的细胞系,其能够在无血清培养基中高表达生产蛋白及病毒载体。293-6E细胞为悬浮状态,主要用于蛋白表达。

293F(Fast-growth)细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系。293FT细胞是在293F细胞系中插入pCMV-SPORT6-TAg.Neo质粒的转化细胞系,能够快速增殖,易转染,用于慢病毒载体的生产,适合制造高滴度慢病毒。293FTM细胞来源于Flp-InTMT-RETM293细胞,该细胞系中稳定转染ecotropic receptor质粒及MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap)报告质,主要用于蛋白互作的筛选。
293S(suspension)细胞是被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。293SG是293S细胞用甲基磺酸乙酯诱变处理,蓖麻毒素选择后再转染pcDNA6/TR质粒得到耐受蓖麻毒素的细胞系。该细胞系为悬浮培养,缺少N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶 (N-acetyl-glucosaminyl transferase I, GnTI)活性,可促进蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修饰。该细胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表达。此外,该细胞系中具有四环素表达抑制基因,可用于四环素诱导的蛋白表达研究。293SGGD细胞系是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系,其主要用于糖基化工程研究中。
根据各自的用途归纳下来,293细胞主要的细胞系可分为293T细胞--瞬时转染,蛋白表达,293H/A细胞--噬菌斑或空斑实验,293E细胞--重组蛋白的生产、293F细胞--慢病毒的生产和293S细胞--糖基化蛋白的表达。(综合整理自文献和网络。参考文献:Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.)
细胞实验是科研实操的基本技能。把细胞养护好,并不容易,但是值得花心思搞定。不同的细胞具有不同的特性,形态、生长周期、胰酶消化时间、培养基类型、转染效率、冻存/复苏难易。养细胞如同喂孩子,操作前中后,多喷几次酒精,注意紫外照射,不同细胞培养基不混用等。
一、人类肿瘤细胞株 | |
(一)消化系统 | |
MCG803 | 人胃腺癌细胞 |
SCG-7901 | 人胃腺癌细胞 |
HGC-27 | 人胃癌细胞(未分化) |
LOVO | 人结肠癌细胞 |
SW480 | 人结肠腺癌细胞系 |
BEL-7402 | 人肝细胞癌细胞 |
HePG-2 | 人肝细胞癌细胞 |
SMMC-7721 | 人肝细胞癌细胞 |
QGy-7701 | 人肝癌细胞 |
Hep-3b | 人肝癌细胞 |
Bel-7402-Tet-on | 转染四环素正向调控表达基因7402细胞 |
7402-Tet-on-EGFP | 转染绿色荧光蛋白和四环素正向调控表达基因7402细胞 |
Panc-1 | 人胰腺癌细胞 |
SW1990 | 人胰腺癌细胞 |
Bxpc-3 | 人原位胰腺癌细胞 |
KB | 人口腔上皮癌细胞 |
Hep-2 | 人喉癌细胞 |
KV | 人口底癌细胞耐药株[长春新碱(VCR)诱导高表达(p-gp)] |
HIC | 人小肠癌细胞 |
(二)呼吸系统 | |
HLamp | 人肺巨细胞癌细胞 |
A549 | 人肺小细胞腺癌细胞 |
95D | 人高转移肺腺癌细胞 |
NCI-H460 | 人大细胞肺癌细胞 |
NCI-H446 | 人小细胞肺癌细胞 |
GLC-82 | 人肺腺癌细胞 |
GLC-82-TK | 人肺腺癌细胞(转染TK基因的GLC-82细胞) |
L78 | 人肺腺鳞癌细胞 |
CNE-1 | 人鼻咽癌细胞(高分化) |
CNE-2 | 人鼻咽癌细胞(低分化) |
SUME-a | 人鼻咽癌细胞 |
HNE-2 | 人鼻咽癌细胞 |
(三)血液系统 | |
K562 | 人慢性髓原白血病细胞 |
HL-60 | 人早幼粒急性白血病细胞系 |
U937 | 人组织细胞淋巴瘤细胞 |
HEL | 人红白细胞白血病细胞Erythroleukemia |
KGIa | 人髓系白血病细胞系 |
Raji | 人Burkitt's淋巴瘤细胞/人B淋巴细胞瘤细胞株 |
SW1353 | 人骨肉瘤细胞 |
MG-63 | 人成骨肉瘤细胞 |
Daudi | 人白血病细胞 |
(四)神经系统 | |
SW038-C2 | 人脑胶质母细胞瘤细胞 |
SW038-C2-tk | 转染了tk基因的SW038-C2细胞 |
SHG-44 | 人星形胶质细胞瘤细胞 |
BT-325 | 人神经胶质瘤细胞 |
U251 | 人星形胶质细胞瘤细胞 |
SF-295 | 人XG恶性胶质瘤细胞 |
SK-N-SH | 人神经母细胞瘤细胞 |
U87 | 人脑胶质瘤细胞 |
(五)泌尿生殖系统 | |
Hela | 人宫颈癌细胞 |
Siha | 人宫颈鳞状细胞癌细胞系 |
RL-952 | 人子宫内膜癌细胞 |
HO-8910 | 人卵巢癌细胞 |
OVCAR-3 | 人卵巢腺癌细胞 |
Bcap-37 | 人乳腺癌细胞 |
MDA-mB-231 | 人乳腺癌细胞 |
MCF-7 | 人乳腺腺癌细胞 |
Du-145 | 人前列腺癌细胞 |
PC-3 | 人前列腺腺癌细胞 |
T-24 | 人移行细胞膀胱癌细胞系 |
(六)其它 | |
A431 | 人皮肤基底细胞癌细胞 |
HT-1080 | 人纤维肉瘤细胞 |
HKF | 人瘢痕疙瘩成纤维细胞 |
RD | 人恶性胚胎横纹肌瘤细胞 |
二、人类正常细胞株 | |
ED-25 | 人肝静脉内皮细胞 |
ECV304 | 人脐静脉内皮细胞 |
Ealy926 | 肠系膜下腔动脉血管内皮细胞 |
D407 | 人视网膜色素上皮细胞 |
HLF | 人胚肺成纤维细胞 |
HSC | 人肝星状细胞 |
L-o2 | 人正常胎肝细胞 |
PA317-tk | 转染入tk基因的PA317细胞 |
PA317-GFP | 转染入GFP基因的PA317细胞(GFP-绿色荧光蛋白) |
293 | 腺病毒包装的人胚肾细胞 |
HEK-293 | 人胚肾细胞 |
HK-2 | 人肾小管上皮细胞系 |
HEB | 人脑胶质细胞株 |
OKT3 | 总T淋巴细胞 |
三、动物肿瘤细胞株 | |
H22 | BALB/c小鼠肝癌细胞 |
RM-1 | 小鼠前列腺癌细胞 |
Walker-256 | 大鼠肝癌细胞(乳腺癌细胞接种到肝脏成瘤) |
CBRH7919 | 大鼠肝癌细胞(wistar 大鼠) |
Hepa | 小鼠肝癌细胞(体内) |
HePa1-6 | 小鼠肝癌细胞(C57BL小鼠) |
Lewis | 小鼠肺癌细胞 |
C26 | 小鼠结肠癌 |
CT-26 | 小鼠结肠腺癌BALB/C |
S-180 | C57BL/6小鼠肛门纤维肉瘤细胞 |
B16 | C57BL/6小鼠黑色瘤细胞 |
ECA | 小鼠艾氏腹水瘤细胞 |
PC-12 | 大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(褐鼠) |
C6 | 大鼠胶质瘤(褐鼠) |
RIN-m | 褐鼠胰岛素瘤上皮细胞 |
P815 | 小鼠肥大细胞瘤细胞 |
SP2/o | 小鼠骨髓瘤细胞 |
P388 | 小鼠白血病细胞 |
Yac-1 | 小鼠白血病细胞NK细胞靶细胞 |
Renca | 小鼠肾癌细胞 |
NIT-1 | 小鼠胰岛素瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠,SV40巨T抗原) |
4T1 | 小鼠乳腺癌细胞 |
四、动物正常细胞株 | |
BRL | 大鼠正常肝细胞(Buffalo) |
RAW 264.7 | 小鼠单核巨噬细胞(BALB/c小鼠) |
NIH/3T3 | NIH小鼠成纤维细胞(NIH/swiss) |
L929 | 小鼠成纤维细胞(C3H/An) |
BALB/C-3T3 | BALB/C小鼠成纤维细胞 |
MEF | 早代小鼠胚胎成纤维细胞(KM鼠) |
c2c12 | 小鼠成肌细胞系 |
PA317 | 逆转录病毒包装用的鼠胚胎成纤维细胞 |
V79 | 中国仓鼠肺细胞 |
CHO | 中国仓鼠卵巢细胞 |
CHO-AA8 | 转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞 |
Cos-7 | SV40转化的非洲绿猴肾细胞 |
Vero | 非洲绿猴肾细胞 |
Vero-E6 | 非洲绿猴肾细胞 |
MA-104 | 恒河猴肾细胞 |
MDCK | 狗肾细胞 |
VX2 | 兔的肝细胞 |
NRK | 大鼠肾小管上皮细胞 |
HBZY-1 | 大鼠肾小球系膜细胞EC |
五、干细胞类 | |
D3 | 129小鼠ES细胞 |
E14 | 129小鼠ES细胞 |
B/c-ES | BALB/c小鼠ES细胞 |
MSCS | 猴的骨髓间充质细胞 |
SDBMSC | SD大鼠骨髓间充质细胞 |
