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293细胞是最常用的实验细胞
2021-10-21 2923

细胞培养是从事科研工作最基本的技能。我们将从常用细胞目录展开,并分享细胞实验相关技能。以下是来自中山大学细胞库目录,供果友们参考,并不全面,但是足够果友们参考。一株细胞的价格在1000~3000,稀有细胞可能更贵。对于从事肿瘤相关研究,常用的肿瘤细胞株需要熟悉。


培养过细胞的小伙伴们,肯定听过293细胞 (全名HEK293),但至于293细胞家族的其他衍生细胞却未必熟悉。293细胞的衍生细胞可分为数种,比如293T细胞,293A细胞,293E细胞,293FT细胞等等。有网友总结说,293A是用来包腺病毒的,293T是用来包慢病毒的。总体而言,293细胞容易转染,是实验室最常用的表达兴趣基因的细胞株。


最原始的HEK293细胞来源于一个夭折的人类胚胎肾细胞(1973年)。HEK293细胞是原代人胚肾细胞转染5型腺病毒DNA(Ad5 DNA)而得到的永生化细胞,表达稳转的Ad5 DNA的基因,不易贴壁,表达E1A蛋白。293T细胞由HEK293细胞衍生而来,是SV40 large T抗原稳转得到的细胞株,贴壁不牢。293T细胞还表达E1A蛋白,SV40 large T抗原,含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。293T细胞容易转染,用磷酸钙、PEI或脂质体转染,效率均可达90%以上。除用于基因表达及蛋白生产外,还用于慢病毒、逆转录病毒及腺病毒的包装。


293T/17细胞是293T细胞中共转染pBND和pZAP质粒而获得的具有G418耐受的细胞系。该细胞系仍保留高转染效率的特点。293T/17SF细胞是在293T细胞中转入EBV基因形成的转化细胞系,该细胞系主要用于瞬时转染及蛋白表达,类似于293E细胞的作用。


293H细胞是293细胞驯化后得到的、能够在无血清培养体系下快速生长、具有高转染效率及高效蛋白表达性能的细胞系。该细胞系贴附牢固,主要用于噬菌斑检测等。293A (adherent)细胞是293细胞的衍生株,倾向于形成单层细胞(monolayer)。在进行病毒滴度测定的空斑试验(plaque assay)时,293A细胞是均匀的单层,没有细胞重叠和间隙。


293E细胞是293-H细胞中插入EBNA-1基因的细胞系,该基因能够稳定表达EBV病毒的EBNA1蛋白,含有EBV复制起点(oriP)的重组表达质粒。293-6E细胞是在293-H细胞中插入截短过后的EBNA-1基因的细胞系,其能够在无血清培养基中高表达生产蛋白及病毒载体。293-6E细胞为悬浮状态,主要用于蛋白表达。


293F(Fast-growth)细胞是一类能够在无血清中高表达蛋白的野生型293细胞系。293FT细胞是在293F细胞系中插入pCMV-SPORT6-TAg.Neo质粒的转化细胞系,能够快速增殖,易转染,用于慢病毒载体的生产,适合制造高滴度慢病毒。293FTM细胞来源于Flp-InTMT-RETM293细胞,该细胞系中稳定转染ecotropic receptor质粒及MAPPIT (mammalian protein-protein interaction trap)报告质,主要用于蛋白互作的筛选。


293S(suspension)细胞是被驯化成能够悬浮培养且能够耐受低钙离子培养条件的293细胞系。293SG是293S细胞用甲基磺酸乙酯诱变处理,蓖麻毒素选择后再转染pcDNA6/TR质粒得到耐受蓖麻毒素的细胞系。该细胞系为悬浮培养,缺少N-乙酰氨基葡萄糖基转移酶 (N-acetyl-glucosaminyl transferase I, GnTI)活性,可促进蛋白的Man5GlcNAc2N-聚糖型糖基化修饰。该细胞系常用于同源的N-糖基化蛋白的表达。此外,该细胞系中具有四环素表达抑制基因,可用于四环素诱导的蛋白表达研究。293SGGD细胞系是在293SG转染pcDNA3.1-zeo-STendoT质粒的细胞系,其主要用于糖基化工程研究中。


根据各自的用途归纳下来,293细胞主要的细胞系可分为293T细胞--瞬时转染,蛋白表达,293H/A细胞--噬菌斑或空斑实验,293E细胞--重组蛋白的生产、293F细胞--慢病毒的生产和293S细胞--糖基化蛋白的表达。(综合整理自文献和网络。参考文献:Genome dynamics of the human embryonic kidney 293 lineage in response to cell biology manipulations[J]. Nature communications, 2014, 5: 4767.)


细胞实验是科研实操的基本技能。把细胞养护好,并不容易,但是值得花心思搞定。不同的细胞具有不同的特性,形态、生长周期、胰酶消化时间、培养基类型、转染效率、冻存/复苏难易。养细胞如同喂孩子,操作前中后,多喷几次酒精,注意紫外照射,不同细胞培养基不混用等。


一、人类肿瘤细胞株


(一)消化系统


 MCG803

人胃腺癌细胞

 SCG-7901

人胃腺癌细胞

 HGC-27

人胃癌细胞(未分化)

 LOVO

人结肠癌细胞

 SW480

人结肠腺癌细胞系

 BEL-7402

人肝细胞癌细胞

 HePG-2

人肝细胞癌细胞

 SMMC-7721

人肝细胞癌细胞

 QGy-7701

人肝癌细胞

 Hep-3b

人肝癌细胞

 Bel-7402-Tet-on

转染四环素正向调控表达基因7402细胞

 7402-Tet-on-EGFP

转染绿色荧光蛋白和四环素正向调控表达基因7402细胞

 Panc-1

人胰腺癌细胞

 SW1990

人胰腺癌细胞

 Bxpc-3

人原位胰腺癌细胞

 KB

人口腔上皮癌细胞

 Hep-2

人喉癌细胞

 KV

人口底癌细胞耐药株[长春新碱(VCR)诱导高表达(p-gp)]

 HIC

人小肠癌细胞

(二)呼吸系统


 HLamp

人肺巨细胞癌细胞

 A549

人肺小细胞腺癌细胞

 95D

人高转移肺腺癌细胞

 NCI-H460

人大细胞肺癌细胞

 NCI-H446

人小细胞肺癌细胞

 GLC-82

人肺腺癌细胞

 GLC-82-TK

人肺腺癌细胞(转染TK基因的GLC-82细胞)

 L78

人肺腺鳞癌细胞

 CNE-1

人鼻咽癌细胞(高分化)

 CNE-2

人鼻咽癌细胞(低分化)

 SUME-a

人鼻咽癌细胞

 HNE-2

人鼻咽癌细胞

(三)血液系统


 K562

人慢性髓原白血病细胞

 HL-60

人早幼粒急性白血病细胞系

 U937

人组织细胞淋巴瘤细胞

 HEL

人红白细胞白血病细胞Erythroleukemia 

 KGIa

人髓系白血病细胞系

Raji

人Burkitt's淋巴瘤细胞/人B淋巴细胞瘤细胞株

 SW1353

人骨肉瘤细胞

 MG-63

人成骨肉瘤细胞

 Daudi

人白血病细胞

(四)神经系统


 SW038-C2

人脑胶质母细胞瘤细胞

 SW038-C2-tk

转染了tk基因的SW038-C2细胞

 SHG-44

人星形胶质细胞瘤细胞

 BT-325

人神经胶质瘤细胞

 U251

人星形胶质细胞瘤细胞

 SF-295

人XG恶性胶质瘤细胞

 SK-N-SH

人神经母细胞瘤细胞

 U87 

人脑胶质瘤细胞

(五)泌尿生殖系统


Hela

人宫颈癌细胞

Siha

人宫颈鳞状细胞癌细胞系

RL-952

人子宫内膜癌细胞

HO-8910

人卵巢癌细胞

OVCAR-3

人卵巢腺癌细胞

Bcap-37

人乳腺癌细胞

MDA-mB-231

人乳腺癌细胞

MCF-7 

人乳腺腺癌细胞

Du-145

人前列腺癌细胞

PC-3

人前列腺腺癌细胞

T-24 

人移行细胞膀胱癌细胞系

(六)其它


A431

人皮肤基底细胞癌细胞

HT-1080

人纤维肉瘤细胞

HKF

人瘢痕疙瘩成纤维细胞

RD

人恶性胚胎横纹肌瘤细胞

二、人类正常细胞株


ED-25

人肝静脉内皮细胞

ECV304 

人脐静脉内皮细胞

Ealy926

肠系膜下腔动脉血管内皮细胞

D407

人视网膜色素上皮细胞

HLF

人胚肺成纤维细胞

HSC 

人肝星状细胞

L-o2

人正常胎肝细胞

PA317-tk

转染入tk基因的PA317细胞

PA317-GFP 

转染入GFP基因的PA317细胞(GFP-绿色荧光蛋白)

293

腺病毒包装的人胚肾细胞

HEK-293

人胚肾细胞

HK-2

人肾小管上皮细胞系

HEB

人脑胶质细胞株

OKT3

总T淋巴细胞

三、动物肿瘤细胞株


H22

BALB/c小鼠肝癌细胞

RM-1

小鼠前列腺癌细胞

Walker-256

大鼠肝癌细胞(乳腺癌细胞接种到肝脏成瘤)

CBRH7919

大鼠肝癌细胞(wistar 大鼠)

Hepa

小鼠肝癌细胞(体内)

HePa1-6

小鼠肝癌细胞(C57BL小鼠)

Lewis

小鼠肺癌细胞

C26

小鼠结肠癌

CT-26

小鼠结肠腺癌BALB/C

S-180

C57BL/6小鼠肛门纤维肉瘤细胞

B16

C57BL/6小鼠黑色瘤细胞

ECA

小鼠艾氏腹水瘤细胞

PC-12

大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(褐鼠)

C6

大鼠胶质瘤(褐鼠)

RIN-m

褐鼠胰岛素瘤上皮细胞

P815

小鼠肥大细胞瘤细胞

SP2/o

小鼠骨髓瘤细胞

P388

小鼠白血病细胞

Yac-1

小鼠白血病细胞NK细胞靶细胞

Renca

小鼠肾癌细胞

NIT-1

小鼠胰岛素瘤β细胞(NOD/Lt转基因小鼠,SV40巨T抗原)

4T1

小鼠乳腺癌细胞

四、动物正常细胞株


BRL

大鼠正常肝细胞(Buffalo)

RAW 264.7

小鼠单核巨噬细胞(BALB/c小鼠)

NIH/3T3

NIH小鼠成纤维细胞(NIH/swiss)

L929

小鼠成纤维细胞(C3H/An)

BALB/C-3T3

BALB/C小鼠成纤维细胞

MEF

早代小鼠胚胎成纤维细胞(KM鼠)

c2c12

小鼠成肌细胞系

PA317

逆转录病毒包装用的鼠胚胎成纤维细胞

V79

中国仓鼠肺细胞

CHO

中国仓鼠卵巢细胞

CHO-AA8

转入Tet-off调控,含EGFP基因的CHO细胞

Cos-7

SV40转化的非洲绿猴肾细胞

Vero

非洲绿猴肾细胞

Vero-E6

非洲绿猴肾细胞

MA-104

恒河猴肾细胞

MDCK

狗肾细胞

VX2

兔的肝细胞

NRK

大鼠肾小管上皮细胞

HBZY-1

大鼠肾小球系膜细胞EC

五、干细胞类


D3

129小鼠ES细胞

E14

129小鼠ES细胞

B/c-ES

BALB/c小鼠ES细胞

MSCS

猴的骨髓间充质细胞

SDBMSC

SD大鼠骨髓间充质细胞

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关键词:细胞
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